(1)色谱填充性能。
液相色谱柱分离性能的优劣,是由固定相粒度、柱长、由柱内径和填充状况决定的柱压降这三个参数度决定的。
这三个参数度也决定了样品组分的保留时间,保留时间不仅与色谱过程的热力学因素k有关,还直接与决定柱效与分离度的柱性能参数及流动相的黏度有关,这些参数都是影响色谱分离过程动力学的重要因素。
(2)流动相及流动相的极性。
液相色谱中,改变淋洗液组成、极性是改善分离的最直接因素。
液相色谱不可能通过增加柱温来改善传质。
因此大多是恒温分析。
流动相选择在液相色谱中显得特别重要,流动相可显著改变组分分离状况。
(3)流速。
流速大于0.5 cm/s时,H~u曲线是一段斜率不大的直线。
降低流速,柱效提高不是很大。
但在实际操作中,流量仍是一个调整分离度和出峰时间的重要可选择参数。