答案(一)(1)澄清度95%的乙醇较小抽滤 (2)细菌悬液灭菌较小粘性
(二)(1)抗性基因(2)全能性表达充分显微注射(3)短脱分化(4)生长素根的分生组织B
解析(一)(1)果胶是植物细胞壁的主要成分,果胶酶可以催化果胶分解,使用果胶酶处理果汁可以提高果汁的澄清度。为鉴定果胶酶的处理效果,可以用3种方法来检测,如果添加相同体积的体积分数为95%的乙醇,沉淀生成量少的效果好;如果采用离心法,需要用比色计对上清液进行测定,OD值较小的处理效果好;如果采用抽滤的方法,抽滤相同体积的果汁,时间较短的处理效果好。(2)为筛选目标细菌,需要用选择培养基对菌株进行筛选,先用无菌水制成细菌悬液,均匀涂布在LB固体培养基上,然后把若干个浸润过适宜浓度香精油的已灭菌的圆形滤纸片贴在培养基上,通过观察透明圈的大小来判断哪些细菌更符合要求。透明圈直径越小说明香精油对其抑制作用越小,越符合要求,所以选取透明圈直径较小的菌株接种到含有适量果胶的液体培养基中,若观察到液体培养基的粘性下降,则可证明有果胶酶产生。
(二)(1)设计重组Ti质粒时选用的T-DNA要包含目的基因和能表达的抗性基因,通过受体细胞中抗性基因的表达情况筛选出含有目的基因的受体细胞。(2)为获得转基因植株,农杆菌侵染的宿主要具有优良性状、较高的遗传稳定性、全能性表达充分、易被农杆菌侵染等优点。如果植物材料对农杆菌不敏感,不能使用农杆菌导入目的基因,可采用显微注射技术进行转基因。(3)利用带侧芽的茎段诱导获得丛状苗,由于不经历脱分化过程,所以总培养时间比利用茎段诱导产生愈伤组织再获得丛状苗的时间短。(4)生长素比例适当升高,有利于诱导根的分化,还可以通过降低MS培养基浓度的方法来促进生根。
30.(10分)欲研究生理溶液中K+浓度升高对蛙坐骨神经纤维静息电位的影响和Na+浓度升高对其动作电位的影响。请完善以下实验思路,预测实验结果,并进行分析与讨论。
(要求与说明:已知蛙坐骨神经纤维的静息电位为-70 mV,兴奋时动作电位从去极化到反极化达+30 mV。测量的是膜内外的电位变化。K+、Na+浓度在一定范围内提高。实验条件适宜)
回答下列问题:
(1)完善实验思路:
组1:将神经纤维置于适宜的生理溶液a中,测定其静息电位和刺激后的动作电位,并记录。
组2:__________________________________________________________________________。
组3:将神经纤维分别置于Na+浓度依次提高的生理溶液d、e中,测定其刺激后的动作电位,并记录。
对上述所得的实验数据进行分析与处理。
(2)预测实验结果(设计一个坐标,以柱形图形式表示实验结果)。
(3)分析与讨论:
①简要解释组3的实验结果:__________________________________________________。
②用放射性同位素24Na+注入静息的神经细胞内,不久在生理溶液中测量到放射性,24Na+的这种转运方式属于__________。用抑制酶活性的药物处理神经细胞,会使24Na+外流量________。
③刺激脊蛙的坐骨神经,除了在反射中枢测量到动作电位外,还观察到腓肠肌收缩,说明坐骨神经中含有______________神经。
答案(1)将神经纤维分别置于K+浓度依次提高的生理溶液b、c中,测定其静息电位,并记录
(2)如图所示
(3)①细胞外Na+浓度提高,膜内外的浓度差增大,兴奋时,Na+通过Na+通道内流加快,导致动作电位增大②主动转运减少③传入和传出
解析(1)为研究K+浓度和Na+浓度升高对蛙坐骨神经纤维静息电位和动作电位的影响,设计实验时要注意控制实验的自变量和遵循对照实验原则,先设计空白对照组,然后再设计实验组,题目中组3是探究提高Na+浓度对神经纤维动作电位影响的实验组,所以组2应是探究提高K+浓度对神经纤维静息电位影响的实验组,故应将神经纤维分别置于K+浓度依次提高的生理溶液b、c中,测定其静息电位,并记录。(2)K+外流形成静息电位,所以提高细胞外生理溶液K+的浓度,会导致静息电位减小;Na+内流形成动作电位,所以提高细胞外生理溶液的Na+浓度,会导致动作电位增大。因此设计坐标时,横坐标为离子浓度,纵坐标为膜电位,具体如答案所示。(3)①Na+被动转运内流形成动作电位,所以细胞外Na+浓度提高,膜内外的浓度差增大,兴奋时,Na+通过Na+通道内流加快,导致动作电位增大;②正常情况下,神经细胞外Na+浓度高于细胞内,故24Na+出细胞为逆浓度运输,转运方式为主动转运,抑制酶的活性会抑制细胞的细胞呼吸,从而减少ATP的供应,抑制主动转运,使24Na+外流量减少。③刺激坐骨神经,在反射中枢测量到动作电位,说明坐骨神经中含有传入神经;腓肠肌收缩,说明坐骨神经中含有传出神经。