特殊tRNA基因转录时,识别其启动子的酶是D(单选)。
A.病毒的DNA聚合酶 B.宿主的DNA聚合酶
C.病毒的RNA聚合酶 D.宿主的RNA聚合酶
(4)上述子代病毒不能在正常宿主细胞中增殖,没有致病性,因此不经灭活或减毒即可制成疫苗。与不具侵染性的流感病毒灭活疫苗相比,该病毒活疫苗的优势之一是可引起细胞免疫,增强免疫保护效果。
【考点】Q2:基因工程的原理及技术
【专题】41:正推法;548:基因工程.
【分析】基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA﹣﹣分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【解答】解:(1)基因工程中,可以使用PCR技术扩增目的基因。将某些基因(不包括表面抗原基因)内个别编码氨基酸的序列替换成编码终止密码子的序列,导致翻译提前终止,改造后的基因表达时不能合成完整长度的多肽。
(2)将目的基因导入受体细胞前,先将目的基因和载体结合构建基因表达载体,确保目的基因可以在受体细胞内稳定存在并表达。提取宿主细胞的总RNA进行分子杂交鉴定,筛选获得成功表达上述tRNA的转基因宿主细胞。
(3)利用转基因宿主细胞制备疫苗。将(1)中的重组质粒导入(2)中的转基因宿主细胞,并在补加非天然氨基酸的培养基中进行培养,则该宿主细胞能利用上述特殊tRNA,基因转录需要专一性的酶的催化,启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点,RNA聚合酶具有物种专一性,识别其启动子的酶是宿主的RNA聚合酶,故选:D。
(4)病毒侵入体内后,引起身体产生细胞免疫,增强免疫保护效果。
故答案为:
(1)PCR 多肽(或蛋白质)
(2)载体 总RNA
(3)非天然氨基酸(Uaa) D
(4)细胞
【点评】本题考查基因工程的相关知识,意在考查考生运用所学基础知识,结合所学知识解决相关的生物学问题的能力。