II．通过回交使自交系B获得抗除草剂性状

（6）抗除草剂自交系A（GG）与自交系B杂交产生F1，然后进行多轮回交（如图）．自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代积累越来越多自交系B的遗传物质/优良性状．

（7）假设子代生活力一致，请计算上图育种过程F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例，并在图1中画出对应的折线图．若回交后每代不进行鉴定筛选，直接回交，请在图2中画出相应的折线图．

（8）如表是鉴定含G基因植株的4种方法．请预测同一后代群体中，4种方法检出的含G基因植株的比例，从小到大依次是X4，X3，X2，X1．

方法检测对象 检测目标 检出的含G基因植株的比例

PCR扩增基因组DNAG基因 x1

分子杂交总mRNAG基因转录产物x2

抗原﹣抗体杂交总蛋白质G基因编码的蛋白质x3

喷洒除草剂 幼苗抗除草剂幼苗 x4

对Hn继续筛选，最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系．

【考点】9A：杂交育种；Q2：基因工程的原理及技术

【专题】111：图文信息类简答题；548：基因工程．

【分析】1、构建基因表达载体时需要同一种限制酶切割目的基因和运载体，用DNA连接酶链接．为防止酶切产物自身环化，切割目的基因两端常用两种酶分别切割．

2、据表中信息可知：细胞脱分化时使用的激素是2，4﹣D．比较甲乙丙丁4中自交体系，发现自交系乙芽的分化率、根的诱导率都较高，因此自交系乙的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体．

3、转化愈伤组织有含有内含子的报告基因，可产生该基因表达产物，能催化无色物质K呈现蓝色，即K处理该愈伤组织能呈现蓝色．

5、目的基因的检测和表达：

（1）首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术．

（2）其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交．

（3）最后检测 目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取 蛋白质，用相应的 抗体进行抗原﹣抗体杂交．

【解答】解：（1）如果用一种限制酶来切割目的基因两端和质粒时，目的基因两端会出现相同的末端．这样在构建基因表达载体时，会出现3种情况：目的基因﹣目的基因、目的基因﹣运载体、运载体﹣运载体，这样会出现自身环化现象，因此为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶．故选：A．

（2）高度分化的植物细胞脱分化可产生愈伤组织，据表中信息可知：细胞脱分化时使用的激素是2，4﹣D．比较甲乙丙丁4种自交体系，发现自交系乙芽的分化率、根的诱导率都较高，因此自交系乙的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体．

（3）实验最终想使玉米自交系（遗传稳定的育种材料）B为获得抗除草剂性状，可以使用含除草剂的选择培养基，筛选转化的愈伤组织，如果能存活，说明获取具有抗除草剂的性状的愈伤组织．

（4）A、未转化愈伤组织没有含有内含子的报告基因，因此不能产生能催化无色物质K呈现蓝色的物质，A错误；

B、转化愈伤组织有含有内含子的报告基因，可产生该基因表达产物，能催化无色物质K呈现蓝色，即K处理该愈伤组织能呈现蓝色，B正确；

C、农杆菌附着的未转化愈伤组织能在选择性培养基上正常生长，但不含有含有内含子的报告基因，因此不能产生能催化无色物质K呈现蓝色的物质，C错误；

D、农杆菌附着的转化愈伤组织能在选择性培养基上正常生长，并含有含有内含子的报告基因，能产生能催化无色物质K呈现蓝色的物质，故K处理该愈伤组织能呈现蓝色，D正确．

故选：BD．

（6）根据图示可知，自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代积累越来越多自交系B的遗传物质/优良性状．

（7）抗除草剂自交系A（GG）与自交系B（G﹣G﹣）杂交产生F1（GG﹣），F1（GG﹣）回交，即与B（G﹣G﹣）杂交，后代为GG﹣和G﹣G﹣，比例为1：1．

用图显示如下：

（8）根据表格中信息可知：PCR扩增技术可以在体外大量增殖目的基因，故x1含量最多；但已导入到受体细胞中的目的基因不一定完成转录，因此x2＜x1；已导入到受体细胞中目的基因虽然完成转录，但不一定能完成翻译产生相应的蛋白质，故x3＜x2；构建基因表达载体和将目的基因导入受体细胞的概率较小，故x4＜x3．

故答案为：

（1）A

（2）2，4﹣D 乙

（3）除草剂

（4）BD