③如果将上述实验步骤二中浸润在0.3g/mL的蔗糖溶液中的藓类小叶的装片，放在80℃条件下处理一段时间（装片中的藓类小叶保持在0.3g/mL的蔗糖溶液中）．在显微镜下清晰地观察到细胞结构后，为更准确地判断A处颜色，对显微镜的操作方法是改变光圈大小、调节反光镜（电光源亮度）．如果A处呈绿色，可能的原因是高温下细胞膜、叶绿体膜失去选择透过性，叶绿素等色素进入A处．

【考点】3U：观察植物细胞的质壁分离和复原

【分析】分析题图：图示表示观察质壁分离及复原实验中观察到的视野图，视野中细胞可能出于质壁分离状态，也可能出于质壁分离复原状态．由于细胞壁具有全透性，所以A处充满外界溶液，而B处为细胞质中的叶绿体，呈绿色．

【解答】解：（1）观察叶绿体和原生质的流动需要保持细胞活性；观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中，经过盐酸的水解，细胞已经死亡；探究酵母菌细胞呼吸方式需要细胞保持活性；只有破碎红细胞才能提取血红蛋白，因此不能保持细胞活性．

（2）A处充满外界蔗糖溶液，是无色的；B处是藓类小叶的叶绿体，呈绿色．

（3）若实验步骤二中从盖玻片的一侧滴入的是加有伊红（植物细胞不吸收的红色染料）的0.3g/mL的蔗糖溶液，则在显微镜下观察到A呈红色、B处呈绿色．

③如果将上述实验步骤二中浸润在0.3g/mL的蔗糖溶液中的藓类小叶的装片，放在80℃条件下处理一段时间（装片中的藓类小叶保持在0.3g/mL的蔗糖溶液中）．由于蔗糖溶液无色，为了便于观察，应调暗显微镜的视野，即改变光圈大小、调节反光镜．正常情况下，叶绿素分子不会出细胞，如果A处呈绿色，则可能是高温使细胞膜、叶绿体膜失去选择透过性，叶绿素等色素进入A处导致的．

故答案为：

（1）①③

（2）①无色、绿色

②红色、绿色

③改变光圈大小 调节反光镜（电光源亮度） 高温下细胞膜、叶绿体膜失去选择透过性，叶绿素等色素进入A处

【点评】本题考查观察植物细胞质壁分离及复原实验、观察线粒体和叶绿体实验、探究酵母菌细胞呼吸方式实验、血红蛋白的提取和分离实验，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验材料的选取、实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．

31．（6分）酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛（以植物为食）消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入6支试管中，试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

试管编号项目ⅠⅡⅢⅣVⅥ

蒸馏水（mL）2O1111

缓冲液（mL）0210.50.50.5

果胶酶液（mL）O0O0.5O0

蜗牛酶液（mL）O0OO0.50

纤维素酶液（mL）0O0O00.5

实验结果（绿色深浅程度）﹣﹣﹣+++++++++

（注：“+”越多表示绿色越深，“一”表示颜色无显著变化）

（1）实验过程中，需要轻摇试管，其目的是为了使细胞壁与酶充分接触，提高酶解效果，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅。

（2）从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有果胶酶和纤维素酶 等多种酶。该实验中I、Ⅱ、Ⅲ 是空白对照组，其设置意义是排除无关变量的干扰。

（3）用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，并用等渗溶液 洗涤。

（4）原生质体是否符合要求还需进行检验，其检验的方法是低渗涨破法。

【考点】J2：酶活力测定的一般原理和方法

【分析】本题综合考查原生质体的制备方法。

原生质体是植物细胞去除细胞壁后的结构，而去除细胞壁需用相应的酶（纤维素酶和果胶酶）进行处理。

【解答】解：（1）实验过程中，需要轻摇试管，以使细胞壁与酶充分接触，提高酶解效果。

（2）蜗牛以植物为食，所以唾液中含有果胶酶和纤维素酶，I、Ⅱ、Ⅲ没有添加酶溶液为空白对照组。其目的是排除无关变量的干扰。

（3）离心后收集沉淀物，并用等渗溶液清洗，目的是保持细胞正常形态。

（4）要用低渗涨破法来检验原生质体是否符合要求，若没有细胞壁则可以涨破，有则不能涨破。

故答案为：

（1）为了使细胞壁与酶充分接触，提高酶解效果

（2）果胶酶和纤维素酶 I、Ⅱ、Ⅲ排除无关变量的干扰

（3）等渗溶液

（4）低渗涨破法

【点评】本题以图表为载体，考查学生获取和处理信息的能力，分析和解决问题的能力。实验过程中可以变化的因素称为变量。其中人为改变的变量称做自变量，随着自变量的变化而变化的变量称做因变量。除自变量外，实验过程中可能还会存在一些可变因素，对实验结果造成影响，这些变量称为无关变量。要注意无关变量应该相同且适宜。