32．（8分）动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。如图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。

（1）肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞吸收氧气和营养物质、排出代谢废物。

（2）气室中充入5%C02气体的主要作用是维持培养液适宜的pH。

（3）培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的种类和剂量，以保证抗生素对肝脏无害。

（4）有机物X有毒性，可诱发染色体断裂。利用如图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。

材料用具：肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素（刺激淋巴细胞分裂）；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液（使染色体着色），有机物X溶液等。

实验过程：

①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用。

②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置，按下表步骤操作（“√”表示已完成的步骤）。

甲乙丙丁

步骤一：加人肝脏培养液√√√√

步骤二：加入有机物X溶液√√

步骤三：放置肝脏小块√

上表中还需进行的操作是向乙（或丁）组装置中放置肝脏小块。

③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。

④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察染色体形态和数量，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明肝脏小块对有机物X具有解毒作用。

【考点】RC：动物细胞与组织培养过程

【分析】本题考查动物细胞培养的相关知识。

动物细胞培养的基本过程：取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用胶原蛋白酶）处理（消化），形成分散的单个细胞，将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，成为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外，原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。当细胞从动植物中生长迁移出来，形成生长晕并增大以后，科学家接着进行传代培养，即将原代培养细胞分成若干份，接种到若干份培养基中，使其继续生长、增殖。通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。当培养超过50代时，大多数的细胞已经衰老死亡，但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性，即癌变。此时的细胞被称为细胞系。

【解答】解：（1）把肝脏切成小薄片，有利于肝脏细胞的呼吸代谢，即吸收氧气和营养物质、排出代谢废物。

（2）气室中充入5% CO2的作用是形成碳酸来维持培养液适宜的pH。

（3）同时也要注意选择抗生素的种类和剂量来抑制细菌生长。

（4）乙组和丁组没有做处理，向乙（或丁）组装置中放置肝脏小块作为对照实验，有机物X有毒性，可诱发染色体断裂，所以要观察淋巴细胞的染色体形态和数量是否变化。甲组添加肝脏小块，淋巴细胞染色体正常，丙组没有添加，出现染色体异常，说明肝脏小块对有机物X具有解毒作用。

故答案为：

（1）吸收氧气和营养物质、排出代谢废物

（2）维持培养液适宜的pH

（3）种类和剂量

（4）向乙（或丁）组装置中放置肝脏小块 染色体形态和数量 肝脏小块对有机物X具有解毒作用

【点评】本题考查学生对动物细胞培养相关知识的理解和分析能力。动物细胞培养的条件：1、无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害；2、营养物质：无机物（无机盐、微量元素等），有机物（糖、氨基酸、促生长因子等）；3、血清和血浆 （提供细胞生长必须的营养成份）；4、温度和pH（36.5±0.5℃，7.2～7.4）；5、气体环境：95%的空气+5%CO2的混合气体，其中5%CO2气体是为保持培养液的pH稳定。

（1）该遗传病不可能的遗传方式是Y染色体遗传和x染色体隐性遗传。

（3）若Ⅳ﹣3表现正常，那么该遗传病最可能是常染色体显性遗传病，则Ⅳ﹣5的女儿的基因型为AA、Aa、aa。

【考点】A4：常见的人类遗传病

【分析】遗传系谱图的题目首先要判断遗传方式。本题应该用排除法判断遗传方式：Y遗传病在女性中不发病，而本题中女性有患者，所以不是Y遗传病；如果是伴X隐性遗传病，则Ⅲ﹣5的基因型为XaXa，则Ⅱ﹣5的一定是患者，所以不可能是伴X隐性遗传病。

【解答】解：（1）用代入排除法，分别用各种情况代入遗传系谱图逐一排除，遗传系谱图中没有只传男性所以不是伴Y染色体遗传病，Ⅱ﹣4有病，其子正常，所以不是伴x染色体隐性遗传病。

（3）若Ⅳ﹣3表现正常，但是Ⅳ﹣4有病，那么该遗传病不可能是X染色体显性，所以为常染色体显性遗传病。Ⅳ﹣5的基因型为Aa，他的丈夫可能是AA、Aa．其女儿可能为AA、Aa、aa。

故答案为：（1）Y染色体遗传和x染色体隐性遗传

（3）常染色体显性遗传病 AA、Aa、aa

【点评】以系谱图为背景的遗传题，信息容易大，可多方面考查考生的知识水平、逻辑思维能力和计算技巧，试题呈现的形式并不重要，关键是要具备清晰的解题思路，其中最关键的则是遗传方式的判定。

34．（7分）苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。如图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），据图回答下列问题。