(4)若Ⅲ﹣1与Ⅲ﹣2生育一个正常女孩,可推测女孩为B血型的概率为 .若该女孩真为B血型,则携带致病基因的概率为 .
33.(8分)金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理.PCR扩增过程示意图如图,请回答下列问题:
(1)从高表达MT 蛋白的生物组织中提取mRNA,通过 获得 用于PCR扩增.
(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的 位点.设计引物时需要避免引物之间形成 ,而造成引物自连.
(3)图中步骤1代表 ,步骤2代表退火,步骤3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环.
(4)PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键.退火温度过高会破坏 的碱基配对.退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但 的引物需要设定更高的退火温度.
(5)如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有 (填序号:①升高退火温度②降低退火温度③重新设计引物).