18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（D）。

A、白细胞DNAB、病毒蛋白质C、血浆抗体D、病毒核酸

19、如果反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后，DNA分子的数量将达到（D）个。

A、100×30B、100×30×2C、100×302D、100×230

20、PCR扩增产物的分析方法主要有（D）

A、凝胶电泳分析法B、点杂交法C、荧光探针定量PCR法D、A、B、C都是

二、判断题（共20题，每题2分）

1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡。（√）

2、在PCR反应中，dATP在DNA扩增中可以提供能量，同时作为DNA合成的原料。（√）

3、DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋。（√）

4、PCR反应中，复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。（√）

5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。（√）

6、PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等。（√）

7、PCR技术需在体内进行。（×）

8、PCR反应体系中的缓冲液相当于细胞中的体液。（√）

9、核酸的复制是由5＇——→3＇方向进行的。（√）

10、配对的碱基总是A与T和G与C。（√）

11、HBsAg转阴性后一段时间才出现可检测的HBsAb，此段间隔期称之为“窗口期”。（√）

12、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR的探针。（√）

13、PCR反应体系中Mg2+的作用是促进TaqDNA聚合酶活性。（√）

14、若标本中含有蛋白变性剂（如甲醛），PH、离子强度、Mg2+等有

较大改变都会影响Taq酶活性。（√）

15、每个子代DNA分子中均保留一条亲代DNA链和一条新合成的DNA链，这种复制方式称之为半保留复制。（√）

16、发生溶血的标本对PCR结果没影响。（×）

17、“平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和。（√）

18、逆转录聚合酶链式反应（reversetranscription-PCR，RT-PCR）就是在应用PCR方法检测RNA病毒时，以RNA为模板，在逆转录酶的作用下形成cDNA链，然后以cDNA为模板进行正常的PCR循环扩增。（√）

19、在定量PCR中，72℃这一步对荧光探针的结合有影响，故去除，实际上55℃仍可充分延伸，完成扩增复制。（√）

20、PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面（√）

三、简答(共两题，每题10分)

1、PCR技术

答：PCR技术是用一对寡聚核苷酸作为引物（要点1：2分），通过高温变性、低温退火、中温延伸（要点2：5分）这一周期的多次循环，使特异的DNA片段数量指数倍数增加（要点3：3分）。

2、简述定量PCR检测操作的全过程。

答：标本的采集，保存（2分）——→样品前处理（2分）——→待样品充分裂解后点样上机反应（2分）——→反应结束后观察结果（2分）——→发报告（2分）

2022年PCR培训考试试题2

1、可以进行新型冠状病毒检测标本采集人员为?A.经过生物安全培训,培训合格且具备采样技能的人员B.医生C.研究所科研人员D.实验室管理人员

2、新型冠状病毒检测标本首选?A.呼吸道标本B.便标本.C.尿液D.结膜拭子标本

3、从事新冠病毒核酸检测标本采集的技术人员应当经过()培训合格。A.生物安全B.消防安全C.交通安全D.食品安全

4、新型冠状病毒核酸实验室检测技术人员应当具备相关专业的大专以上学历或具有中级及以上专业技术职务任职资格，并有2年以上的实验室工作经历和()培训合格证书。A.全科医生B规培C.基因检验相关D.大型设备

5、根据目前掌握的新型冠状病毒生物学特点、流行病学特征、致病性、临床表现等信息，该病原体暂按照病原微生物危害程度分类中()类病原微生物进行管理?A.第一B.第二C.第三D.第四

6、新型冠状病毒感染的特异性检测不包括?A.核酸检测B.病毒分离C.抗体检测D.生化检测