超净台是正压送风,气流方向是由内向外,进风口在背面或正面的下方,工作台正面的金属网罩内是超级滤清器。保护对象为实验材料。
实验室通风橱气流控制由控制器与风阀来完成,气流方向是由外向内,过滤装置位于通风橱的上部。保护对象为实验室和实验员。
8.进行新冠病毒核酸检测的样本处理区试验台面发生样本溢洒时应如何处理?(5分)(2020)
答:样本在试验台面发生小面积溢洒时,应立即用吸水材料覆盖溢洒区域,覆盖范围要足够大,包括喷溅的最远处。然后用0.55%含氯消毒剂从外围向中心倾倒,直到吸水性材料全部湿润。消毒剂作用30分钟后,用镊子夹取溢洒物及吸水纸放入医疗废弃物收集器,利器及碎玻璃等放入利器盒,操作时注意不要扩大污染范围。再反复用新的吸水材料将剩余液体吸净。再次用0.55%含氯消毒剂对污染区域喷洒、擦拭消毒,用清水擦拭。最后对溢洒及处理结果进行记录和报告。
9.简述:荧光PCR定性项目检测时,弱阳性室内质控品出现假阴性失控的原因。(5分)(2020)
答:(1)核酸提取中的随机误差,如核酸提取中的丢失,有机溶剂的去除不彻底,标本中扩增抑制物的残留,所用耗材如离心管有PCR抑制物等。
(2)仪器的问题,如扩增仪孔间温度的不一致性,孔内温度与所示温度的不一致性等。
(3)试剂的问题,如Taq酶和/或反转录酶的失活,探针的纯度及标记效率和核酸提取试剂的效率等。
10.定性PCR检验项目方法学性能验证参数一般包括哪些?(5分)(2020)
答:定性检测项目验证内容至少应包括测定下限、特异性、准确度(方法学比较或与金标准比较)、抗干扰能力等。
五.论述题(共20分)(2019)
1.某一开展乙肝DNA定性检测的临床PCR实验室,参加盲样测试(包括三个阳性样本,两个阴性样本),该实验室做出的结果为5份样本全部阳性,工作人员将盲样全部阳性的结果确认后立即发出。第二天发现当天的室内质控结果也是全部阳性,并且当天的阳性率明显增高。请回答:
(1)这样做是否正确?(4分)
答:不正确
(2)应该如何处理?(8分)
答:查找分析结果异常原因
(3)分析该情况产生的所有可能原因?(8分)
答:第一,扩增产物的污染。
第二,临床标本的核酸提取过程中发生的样本间的交叉污染。
第三,喷枪等关键耗材污染
第三,试剂污染
第四,仪器故障