24、PCR检测中，经过n个循环的扩增，拷贝数将增加（ C ）

A、n B、2n C、2n D、n2

25、PCR基因扩增仪最关键的部分是（ A ）

A、温度控制系统 B、荧光检测系统 C、软件系统 D、热盖

26、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则（ A ）

A、各区合并 B、注意风向 C、因地制宜 D、方便工作

27、PCR实验室一般包括( D )

A、试剂准备区B、标本制备区 C、扩增区和产物分析区 D、A、B、C都含

28、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（D）。

A、白细胞DNA B、病毒蛋白质 C、血浆抗体 D、病毒核酸

29、如果反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后，DNA分子的数量将达到（ D ）个。

A、100×30 B、100×30×2 C、100×302 D、100×230

30、PCR扩增产物的分析方法主要有（ D ）

A、凝胶电泳分析法 B、点杂交法 C、荧光探针定量PCR法 D、A、B、C都是

二、判断题（共20题，每题2分）

1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡。（√ ）

2、在PCR反应中，dATP在DNA扩增中可以提供能量，同时作为DNA合成的原料。（ √ ）

3、DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋。（√ ）

4、PCR反应中，复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。（√ ）

5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。（√ ）

6、PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等。（√ ）

7、PCR技术需在体内进行。（×）

8、PCR反应体系中的缓冲液相当于细胞中的体液。（√）

9、核酸的复制是由5＇——→ 3＇方向进行的。（√）

10、配对的碱基总是A与T和G与C。（√）

11、HBsAg转阴性后一段时间才出现可检测的HBsAb，此段间隔期称之为“窗口期”。（√）

12、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR的探针。（√）

13、PCR反应体系中Mg2+的作用是促进Taq DNA聚合酶活性。（√）

14、若标本中含有蛋白变性剂（如甲醛），PH、离子强度、Mg2+等有

较大改变都会影响Taq酶活性。（√）

15、每个子代DNA分子中均保留一条亲代DNA链和一条新合成的DNA链，这种复制方式称之为半保留复制。（√）

16、发生溶血的标本对PCR结果没影响。（×）

17、“平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和。（√）

18、逆转录聚合酶链式反应（reverse transcription-PCR，RT-PCR）就是在应用PCR方法检测RNA病毒时，以RNA为模板，在逆转录酶的作用下形成cDNA链，然后以cDNA为模板进行正常的PCR循环扩增。（√）

19、在定量PCR中，72℃这一步对荧光探针的结合有影响，故去除，实际上55℃仍可充分延伸，完成扩增复制。（√）

20、PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面（√）

三、简答(共两题，每题10分)

1、PCR技术

答：PCR技术是用一对寡聚核苷酸作为引物（要点1：2分），通过高温变性、低温退火、中温延伸（要点2：5分）这一周期的多次循环，使特异的DNA片段数量指数倍数增加（要点3：3分）。

2、简述定量PCR检测操作的全过程。